酶(mei)抑制率(lv)法檢(jian)測(ce)原理(li):
多(duo)通道農藥(yao)殘留(liu)速(su)測(ce)儀采(cai)用國(guo)家標準GB/T規定的(de)分(fen)析方法。該方法采(cai)用酶(mei)抑制率(lv)法(分(fen)光光度法),分(fen)析原理(li)是基於壹種生物化學(xue)反(fan)應(ying),即(ji)在(zai)正(zheng)常情況(kuang)下乙(yi)酰(xian)膽(dan)堿(底(di)物)在乙(yi)酰(xian)膽(dan)堿酯(zhi)酶(mei)的(de)作用(yong)下(xia)發(fa)生水(shui)解反(fan)應(ying),生成膽(dan)堿和乙酸,生成的(de)膽堿與(yu)二(er)硫雙對(dui)硝基苯甲酸(顯色劑)產(chan)生(sheng)顯(xian)色(se)反(fan)應(ying),使反(fan)應(ying)液(ye)呈(cheng)黃(huang)色(se)。如(ru)果(guo)樣(yang)品中(zhong)帶(dai)有(you)有(you)機(ji)磷和氨(an)基甲(jia)酸酯類(lei)農藥(yao),由於農藥(yao)的(de)存(cun)在(zai)能(neng)抑制酶(mei)的(de)活(huo)性,使(shi)上述生物化學(xue)反(fan)應(ying)速度減慢(man),從(cong)而使水(shui)解反(fan)應(ying)生成的(de)膽堿減少(shao),使顯(xian)色反(fan)應(ying)產(chan)生(sheng)的(de)黃色(se)變淺。通過測(ce)量(liang)壹(yi)段(duan)反(fan)應(ying)時間內(nei)溶液(ye)顏(yan)色(se)的(de)變化率(吸(xi)光度隨(sui)時間的(de)變化值(zhi)),即(ji)表(biao)示為(wei)農藥(yao)抑制酶(mei)活(huo)性的(de)抑制率(lv)。通過(guo)測(ce)量(liang)抑制率(lv)的(de)大小(xiao),可(ke)以判斷(duan)出樣(yang)品中(zhong)是否有(you)高(gao)劑量(liang)農藥(yao)的(de)存(cun)在(zai)。
酶(mei)抑制率(lv)法產(chan)生(sheng)假陽(yang)性問題(ti)的(de)原因:
酶(mei)抑制率(lv)法測(ce)定某(mou)些蔬(shu)菜(cai)中農藥(yao)殘留(liu)量(liang)存(cun)在(zai)假陽(yang)性,這壹點在國家標準GB/T說(shuo)明中(zhong)就明確(que)指出:“蔥(cong)、蒜(suan)、蘿(luo)蔔、韭(jiu)菜(cai)、芹菜(cai)、香(xiang)菜(cai)、茭(jiao)白、蘑(mo)菇及(ji)番茄汁(zhi)液(ye)中(zhong),含(han)有(you)對(dui)酶(mei)有(you)影響(xiang)的(de)植物次(ci)生(sheng)物質,容易(yi)產(chan)生(sheng)假陽(yang)性”。
綜(zong)合文(wen)獻資料(liao)和研(yan)究,發現產(chan)生(sheng)假陽(yang)性的(de)原因:
1.某(mou)些蔬(shu)菜(cai)樣(yang)品中(zhong)含有(you)對(dui)酶(mei)有(you)抑制作(zuo)用的(de)植物次(ci)生(sheng)物質,它(ta)同樣(yang)也能(neng)起到農藥(yao)抑制酶(mei)活(huo)性的(de)作用(yong),故(gu)會使測(ce)定結(jie)果(guo)偏高(gao),即(ji)產(chan)生(sheng)假陽(yang)性,嚴(yan)重時(shi)使(shi)酶(mei)*失去(qu)活(huo)性,導致無(wu)法測(ce)量(liang)(如(ru)蒜(suan))。
2.另(ling)壹(yi)類(lei)蔬菜(cai)色素(su)含(han)量(liang)高(gao)(如韭(jiu)菜(cai)含葉(ye)綠(lv)素(su)高(gao)),汁液(ye)多(duo)(如(ru)番茄等),經(jing)樣(yang)品處理(li)後會使測(ce)試(shi)溶液(ye)帶(dai)色(se)或(huo)發渾(hun),而這些帶(dai)色(se)或(huo)發渾(hun)的(de)溶液(ye)在(zai)測(ce)試(shi)時(shi)容(rong)易(yi)發生(sheng)變化,從而影響(xiang)光度法的(de)測(ce)定。